養殖場(chǎng)專(zhuān)用非洲豬瘟檢測試劑盒 -非洲豬瘟檢測試劑#2022已更新我國各地先后出現多起非洲豬瘟疫情,在一定程度上擾亂了社會(huì )秩序。從感染對象分析,豬瘟雖然只能感染豬,但是由于其傳播速度快、病程短、致死率高的特點(diǎn),導致大批量被感染的豬迅速死亡,給整個(gè)養豬業(yè)都帶來(lái)嚴重的經(jīng)濟損失。
核酸DNA提取試劑盒(柱膜法)使用說(shuō)明書(shū)
【產(chǎn)品名稱(chēng)】
通用名稱(chēng):病毒DNA提取試劑盒
英文名稱(chēng):Extraction Kit for Virus DNA
【預期用途】
本試劑盒主要用于疑似病毒等病原感染抗凝血、血淸、拭子、組織、飼料及環(huán)境中的病毒DNA的提取,純化的核酸可適用于各種常規操作及PCR試驗。
【試劑盒組分】
I、試劑盒組成及貯藏條件
名稱(chēng) | 20 T | 50 T |
1、吸附柱 | 20個(gè) | 50個(gè) |
2、收集管 | 20個(gè) | 50個(gè) |
3、裂解液 | 5 mL | 11 mL |
4、洗液I | 13 mL | 32 mL |
5,洗液II | 13 mL | 32 mL |
6.洗脫液 | 1.2 mL | 3 mL |
2、 保存條件及有效期:室溫下保存,有效期12個(gè)月.
3、 需自備材料:無(wú)水乙醇、1.5 mL無(wú)菌離心管、1.5 mL無(wú)菌離心管(長(cháng)臂型)、生理鹽水、研缽、無(wú)菌
1mL, 2OOuL、10uL槍頭、記號筆等。
【操作步驟】
一、樣品制備
1、 血液樣品:抗凝血樣品置離心管中,8000轉/分鐘離心2分鐘,取上層血漿;非抗凝血樣品置離心 管中,待凝固后,8000轉/分鐘離心2分鐘,取上層血清,置于滅菌離心管中,編號待檢。
2、 組織樣品:采集脾臟、肝臟、淋巴結、扁桃體等病變組織樣品0.1g.組織勻漿器或研缽中充分勻漿或研磨,加入1 mL生理鹽水混勻,8000轉/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心骨中,編號待檢。
3、 口腔液:進(jìn)食前用拭子/口腔液采集袋或自制棉線(xiàn)綁紗布團吸引動(dòng)物咀嚼,收集口腔液大于 500uL, 8000轉/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心管中,編號待檢。
4、 飼料:取適量研磨后的飼料(約0.2g),放入含1 mL生理鹽水或PBS(PH為7.4)緩沖液的2 mL EP 管屮,振蕩混勻,8000轉/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心管中,編號待檢.
5、 灰塵:用無(wú)菌棉簽蘸取適量環(huán)境表面上的灰塵,放入含1 mL生理鹽水或PBS(PH為7.4)緩沖液的2 mL EP管中,振蕩混勻,8000轉/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心管中,編號待檢。
二、DNA的提取
1、取裂解液200uL加入無(wú)核酸酶1.5 mL離心曾屮,分別加入血漿/血清/組織液等樣品液200uL. 震蕩混勻10秒或顛倒混勻10次,室溫放置5分鐘(如果室內溫度較低時(shí).需放置25C水浴溫育),再加入200uL無(wú)水乙醇,顛倒混勻10秒;若樣品渾濁則先12000轉/分鐘離心1分鐘處理,取上清液,以避免堵塞柱子;
2、 將液體轉入套有收集管的吸附柱中, 12000rpm離心1分鐘:
3、 棄收集管液體,向吸附柱中加600uL洗液I , 12000 rpm離心1分鐘;
4、 棄收集管液體,向吸附柱中加600uL洗液II, 12000 rpm離心I分鐘;
5、 棄收集管液體,12000 rpm離心2分鐘,以去除殘留洗液;
6、將吸附柱轉入新的無(wú)核酸酸1.5mLEP管(長(cháng)臂型)中,向柱中央滴加50 uL洗脫液,靜置1分鐘, 12000 rpm離心1分鐘,EP管中液體即為病毒DNA。
【注意事項】
1、 實(shí)驗前諾仔細閱讀本試劑盒說(shuō)明書(shū),嚴格按照操作步驟執行.在操作過(guò)程中對時(shí)間、試劑體積等 粘確控制可以獲得好的結果。
2, 樣本應新鮮采集使用,或低溫運輸儲存;
3, 樣本具有潛在感染風(fēng)險,核酸的提取應在核酸提取實(shí)驗室的生物安全柜中進(jìn)行。
4、 核酸提取冇關(guān)耗材確保高溫滅菌,提取后核酸盡快進(jìn)入下一步試驗或冷凍保存待用。
5, 試劑使用前應混合均勻,試劑具有一定腐蝕性,使用時(shí)請戴手套、口罩做好防護。
6. 低溫下裂解液出現結晶數屬正?,F象,可在60°C水浴加熱助溶后使用。
7、 實(shí)驗產(chǎn)生的廢棄物應及時(shí)收集,遠離PCR實(shí)驗室進(jìn)行無(wú)害化處理。
僅供獸醫診斷使用
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