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非洲豬瘟試劑盒 診斷試劑盒

簡(jiǎn)要描述:非洲豬瘟試劑盒 診斷試劑盒可以及時(shí)發(fā)現隱性感染豬,消除感染源;準確調整免疫程序,確保豬場(chǎng)各階段豬豬瘟疫病的抗體水平始終處于有效水平。實(shí)行有效監測。

  • 產(chǎn)品型號:TH-P1600
  • 廠(chǎng)商性質(zhì):生產(chǎn)廠(chǎng)家
  • 更新時(shí)間:2024-03-31
  • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:1001

詳細介紹

品牌云境天合名稱(chēng):非洲豬瘟病毒熒光PCR核酸檢測試劑盒
有效期12個(gè)月規格50頭份/盒

非洲豬瘟試劑盒 診斷試劑盒非洲豬瘟試劑盒 診斷試劑盒及時(shí)有效的對豬群豬瘟疫病采取監測、診斷,可以有效避免豬群染病,大程度的保護豬群養殖戶(hù)的經(jīng)濟利益,為豬群的健康成長(cháng)提供有利條件,實(shí)現豬場(chǎng)豬瘟監測成功化。

4.jpg

非洲豬瘟病毒熒光PCR核酸檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)

【獸藥名稱(chēng)】

通用名稱(chēng):非洲豬瘟病毒熒光PCR核酸檢測試劑盒

漢語(yǔ)拼音:Feizliouzhuwen Bingdu Yingguang PCR Hesuan Jianceshijihe

英文名稱(chēng):African swine Fever Virus (ASFV) PCR Nucleic Acid Diagnostic Kit

商品名稱(chēng):無(wú)

【主要成分與含量】試劑盒中含有如下組分:

試劑盒組分

含量

陽(yáng)性對照

250μL/管×1管

陰性對照

250μL/管×1管

PCR反應液

850μL/管×1管

萌混合液

150μL/管×1管

說(shuō)明書(shū)

1份/盒

【作用與用途】 本試劑盒可用于血液、脾臟、肝臟、淋巴結、 樣品中非洲豬瘟病毒核酸的檢測。

扁桃體、腎臟、肌肉、環(huán)境樣品等

【用法與判定】

1 用法

1.1待檢樣品釆集、保存及運輸

1.1.1樣品釆集

(1) 活豬樣品 無(wú)菌采集抗凝血或血清5mL

(2) 病死豬剖檢樣品或屠宰場(chǎng)剖檢樣品 無(wú)菌采集死豬的牌、肺、腎、扁桃體、淋巴結、肌肉等組織樣品。2?8°C低溫運至實(shí)驗室用于檢測。

(3) 病豬污染的周邊環(huán)境 采集與病豬相關(guān)場(chǎng)所的糞便、飼料、污水樣品。2?8°C低溫運至實(shí)驗室用于檢測。

1.1.2樣品保存 采集的樣品在2?8°C保存應不超過(guò)24小時(shí),-70°C條件下保存,避免反復凍 融。

1.1.3樣品運輸泡沫箱加冰袋后密封進(jìn)行運輸。包裝和運輸應符合農業(yè)農村部《高致病性動(dòng) 物病原微生物菌(毒)種或者樣品運輸包裝規范》和交通運輸部門(mén)關(guān)于危險品運輸管理的有關(guān)規定。

1.2樣品處理

1.2.1血液樣品處理 抗凝血樣品置于離心管中,8000 r/min離心2分鐘取上層血漿,編號待 檢。非抗凝血樣品置于離心管中,待凝固后,8000 r/min離心2分鐘取200μL上層血清,編號待檢。

1.2.2組織樣品處理取適量脾臟、肝臟、淋巴結、扁桃體、肌肉等組織,置于研磨器或研磨管中研磨,再加適量生理鹽水混勻,制成約10%的組織勻漿,8000 r/min離心2分鐘,取200μL上 清于RNase/DNase-free無(wú)菌離心管中,編號備用。

1.2.3環(huán)境樣品處理

1.2.3.1糞便、飼料樣品處理方法取適量的糞便、飼料放入盛有PBS緩沖液的研磨管中研磨混勻,制成約10%的勻漿液.8000 r/min離心2分鐘,取200μL上清于RNase/DNase-free無(wú)菌離心 管中,編號備用。

1.2.3.2污水樣品處理方法 直接取200μL污水進(jìn)行核酸提取。

1.3病毒核酸的提取用磁珠法或柱式法進(jìn)行DNA核酸提取。

1.4熒光PCR反應:

1.4.1從試劑盒中取出熒光PCR反應液、酶混合液,室溫融化后,2000 r/min離心5秒。設被 檢樣品、陽(yáng)性對照和陰性對照總和為n,則反應體系配制如下:


試劑 體系

PCR 反應液 17× (n+1) μL

酶混合液        3× (n+1) μL

1.4.2在新的RNase/DNase-fire 1.5 ml離心管中加入上述試劑,充分混勻后瞬時(shí)離心。按照20μL/ 管分裝量將試劑分裝至熒光PCR反應管。

1.4.3在上述制備好的熒光PCR反應管中分別加入陰性對照、陽(yáng)性對照各5μL、處理好的待測核酸各5μL,終體積25μL/管,蓋好熒光PCR反應管蓋,混勻后瞬時(shí)離心,轉移到熒光PCR儀器 上。

144將PCR反應管放置在熒光PCR儀樣品槽中,在熒光PCR儀上運行以下程序:

步驟

條件

循環(huán)數



50, 1





預變性

℃3分鐘

95 ℃: 8 秒 55 ℃: 8 秒

PCR擴増

40

熒光通道選擇FAM,在PCR擴增階段每個(gè)循環(huán)的55時(shí)采集熒光信號。設置擴增體系為25μL, 同時(shí)要選擇passive reference和quencher為none的模式。(注:若熒光PCR儀(如AB17500)按說(shuō)明 書(shū)中的反應程序設置后因持溫時(shí)間短無(wú)法運行,可將預擴增和PCR擴增條件變更為95C: 5秒 55°C: 30 秒)

2結果判定

2.1試驗有效性判定

陽(yáng)性對照有典型擴增曲線(xiàn)且Ct值≤30.且陰性對照無(wú)Cl值或無(wú)擴增曲線(xiàn),線(xiàn)形為直線(xiàn)或輕微斜線(xiàn),無(wú)指數增長(cháng)期。則判試驗結果有效。否則,此次試驗視為無(wú)效。

2.2樣品判定

2.2.1陽(yáng)性:樣本檢測結果Ct值≤35且有明顯指數增長(cháng)期,判定檢出非洲豬瘟病毒核酸。

2.2.2可疑:樣本檢測結果Ct值在35?38范圍內。此時(shí)應對樣本進(jìn)行重復檢測,如果重復實(shí)驗 結果Ct值仍在35?38范圍內,有明顯指數增長(cháng)期.則判定為陽(yáng)性,否則為陰性。

2.2.3陰性:樣本檢測結果Ct值>38或無(wú)Ct值,判定未檢出非洲豬瘟病毒核酸。

【注意事項】(1)實(shí)驗前請仔細閱讀本試劑盒說(shuō)明書(shū),嚴格按照操作步驟執行,在操作過(guò) 程中對時(shí)間、試劑體積等精確控制可以獲得好的結果。

(2) 實(shí)驗室應嚴格按照有關(guān)規定分區管理,依照配液區-模板提取區-擴增區-分析區順序 進(jìn)行基因檢測。各區間人員、器材、試劑及空氣流向應有嚴格要求。

(3) 核酸提取有關(guān)耗村確保潔凈、無(wú)DNase/RNase,提取過(guò)程盡量低溫、快速,完成后進(jìn)入 下一步實(shí)驗或凍保。

(4) 對于頂部采光儀器要帶新的一次性PE手套對熒光PCR管封蓋,對于底部采光儀

器要避免徒手或使用過(guò)的手套接觸熒光PCR管底,檢測過(guò)程中使用不帶熒光物質(zhì)一次性乳膠手套。

(5) 凍存試劑使用前應于室溫下*融化,瞬時(shí)離心使液體*沉于管底。避免反復凍融, 以免影響試劑性能。

(6) 樣品、陽(yáng)性對照等在使用后及時(shí)封蓋,.避免組分間及氣溶膠等的污染造成假陽(yáng)性。

(7) 擴增產(chǎn)物禁止開(kāi)蓋,實(shí)驗產(chǎn)生的廢棄物應及時(shí)收集,遠離PCR實(shí)驗室進(jìn)行無(wú)害化處理。

【規格】50頭份/盒

【貯藏與有效期】試劑盒置-20°C以下避光保存,有效期12個(gè)月。

【批準文號】獸藥生字163668871

【生產(chǎn)企業(yè)】鄭州中道生物技術(shù)有限公司

僅供獸醫診斷使用



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